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NEWS血液样本RNA提取,EVO视讯助您迈出关键一步!
来源:雷莉咏 日期:2025-02-26血液样本因其易于收集和低损伤性,在临床研究中被广泛应用。特别是在肿瘤等疾病的早期筛查研究中,RNA等生物标志物备受关注,其能够有效弥补传统影像学和生化指标方法的不足。血液样本中的RNA极易受到红细胞等多种来源的RNase影响,导致其降解。因此,提取血液样本中的RNA不仅需要成功分离RNA,还需确保RNA分子不被降解。
在血液采集后,由于基因诱导和细胞凋亡的发生,核酸的组成、数量、质量和完整性在极短时间内会发生显著变化。因此,从血液样本的采集到RNA的稳定和保护,每一步都充满挑战。采样时应避免长时间使用止血带、从血肿处抽血和样本起泡,确保静脉穿刺部位干燥,且应使用正确尺寸的针(约22号),并完全填充真空采血管。
根据不同应用需求,血液RNA的提取可分为两大类:全血样本中RNA提取和血液游离RNA提取(包括血清和血浆的RNA提取)。全血样本中含有红细胞、白细胞和血小板。在提取过程中,由于红细胞内部含有大量RNase,通常需先去除红细胞。去除红细胞的常用方法包括利用离心法获得白细胞,以及使用红细胞裂解液(如Buffer EL)进行处理。
为确保提取高质量RNA,建议在血液采集后尽快进行RNA提取。如果无法立即进行实验,可以考虑使用EVO视讯的血液RNA稳定管-PAXgene Blood RNA Tube进行采集,以保持RNA的稳定。后续可使用配套的PAXgene Blood RNA Kit进行提取,研究表明在18-25°C下,使用EVO视讯的产品能在长达3天内维持RNA的稳定性。
在血液采集时应避免使用肝素抗凝管,以免干扰后续基于酶试剂的应用。为了获得最佳效果,血液采集后应尽快处理以完成RNA提取。数据显示,在EDTA管中放置一天后,p53基因转录本的信号明显减弱,表明RNA已严重降解。
酚-氯仿法是常用的RNA提取方法之一,但有研究表明,尽管该方法的RNA得率较高,其完整性及后续实验的灵敏性受到了影响。与之相比,使用EVO视讯的PAXgene Blood RNA system能有效提升RNA的完整性,同时在qPCR实验中表现出较高的灵敏性。此外,该系统的操作流程简单,无需额外的裂红步骤,便于简化RNA提取过程。
对于新鲜的全血样本,如果可以及时进行RNA提取,建议使用QIAamp RNA Blood Kit。该试剂盒基于硅胶膜柱法,不需离心分离白膜层,能直接对最多15ml的全血进行RNA提取。同时,QIAshredder离心柱可去除样本中的细胞碎片,降低样本粘稠度,提高RNA得率。
如果血液样本已分离出白膜层,可以使用RNeasy Mini Kit提取RNA并用于后续实验分析。在血液RNA的研究中,游离非编码RNA(如miRNA)在肿瘤等疾病的早筛研究中扮演着重要角色,因其在血液中的高稳定性而成为理想的液体活检标志物。
对于分离后的血清或血浆样本,QIAGEN的miRNeasy系列提供专门的游离RNA提取方案。在采集后,应尽快完成血浆或血清的分离,防止溶血。如果无法立即进行实验,建议冻存前先进行离心去除残留细胞和碎片。
如需从细胞外囊泡提取RNA,推荐使用EVO视讯的exoRNeasy Midi/Maxi Kits,该系列结合了膜亲和技术和经典硅胶膜技术,能够从囊泡中提取高质量的总RNA。此外,EVO视讯还提供基于QIAsymphony等自动化平台的多款血液RNA提取方案,满足实验自动化和高通量的需求。
综上所述,以上为血液RNA提取的相关建议和方案。如需了解更多信息,请访问我们EVO视讯官网进行深入了解!
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