液体培养基的操作步骤

一、准备工作

首先，准备一支含有5~10mL液体培养基的试管和两个平板。然后，打开安全柜，用酒精灯灼烧试管的顶部，迅速滴上无菌水使其破裂，接着用镊子将其敲碎。

二、培养基的处理

接下来，吸取0.5mL液体培养基加入冻干管中，充分溶解后再将其打回到液体试管中，轻轻混匀。随后，吸取0.2mL的菌悬液加入平板中，确保涂布均匀，并重复此步骤以获取两个平板。

三、培养条件

最后，将液体试管和平板都置于适当的培养条件下进行培养，待菌种长出后即可使用。

培养基的制备

一、器皿准备

准备所需的器皿，如三角瓶、试管、培养皿、烧杯和吸管等，并根据不同情况进行清洗、干燥、包装和灭菌处理。

二、配料及溶解

在烧杯中加入适量水，遵循培养基配方称取各项材料，依次加入缓冲化合物、主要元素、微量元素和维生素等，直到全部溶解，并补足所需的水量。

三、调节与过滤

调节pH值后，加入如琼脂或明胶等凝固剂，将其在液体培养基中加热不断搅拌至完全融解，并补足蒸发造成的水分。处理完成后进行过滤、分装及标识，确保灭菌和无菌检查完毕。

接种流程

一、不同的接种方式

根据菌种的不同特征，可以选择点接、中央划线、稀波状蜿蜒划线法等不同接种方法。

二、液体接种

用无菌滴管或挑取固体斜面上的少量菌种接种于新鲜的液体培养基中。

培养及后续处理

一、培养条件

将接种后的培养基放置在适宜的培养箱中，待细胞达到稳定期或成熟孢子后使用。

二、保藏条件

菌种应在4℃-6℃条件下保存，并每3-6个月进行一次移植，某些菌种如芽裂酵母可能需每1-3个月移植一次。湿度应维持在50%-70%之间。

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